分子克隆实验指南（套装上下册）

出版时间：2002-8  出版社：科学出版社  作者：J.萨姆布鲁克  页数：1949  译者：黄培堂  
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前言

　　《分子克隆实验指南》第一版写于约20年前，当时分子克隆的基本方法远未成熟，仅在少数几个实验室建立了起来。《分子克隆实验指南》的出版大大改变了这种局面，其指南性的特点使20世纪70年代后期和80年代早期对这些技术仍感到陌生的读者获得了信心。本书第二版于第一版出版后的第7年出版，通俗易懂，内容更丰富。此时，个别方法日益通用和简化，但是在多步骤的实验环节中仍然难以把它们成功地串在一起。作为第二版的修订本，第三版反映出的是一种成熟的操作规程，可靠性高，十分有利于科技人员的使用操作。在20世纪90年代，为满足科技人员的要求许多枯燥且重复性强的分子生物学技术已经实现自动化了。为满足科技人员的要求，多步骤的实验环节已被转换成试剂盒。现在很容易从商业制造商那里买到高质量的基因组和cDNA文库。而且包括核酸在内的所有手工操作也极大地受益于试剂和酶的质量的提高。伴随着这些进步及其他方面的发展，合格的实验室工作者现在能够轻易避免许多实验方面的问题，而这些问题在几年前还曾困扰着最熟练的研究人员。并非表明每一细节都尽善尽美，也不是说技术不可能有进一步的发展了。然而，现在通过认真仔细地实验设计并应用已有知识，比反复试验能够更容易地避免困难。　　《分子克隆实验指南》所有版本的主要目的就是给科研人员提供最新的重复性好的技术方法。前两版的使用者将会发现本版实验部分具有组织良好的特征。不仅如此。本版内容更为全面而详尽。老方法被现代化了，而新的方法也被增加进来，从而使分子克隆技术几乎渗透到生物医学研究的绝大多数领域。同样重要的是我们希望提供合理的依据，证明在可供选择的程序中，特定方法为什么及如何起作用。因此这个版本不仅包含了对于实验方法中要点的说明，还将丰富的材料以信息栏的形式列示出来，放在每章的末尾和附录9中。我们希望贯穿在本书中的115个信息栏可以对为什么某些技术方法中要用某些方式，以及某些技术怎样逐步发展等问题予以清晰的说明。最后，我们提供了丰富的参考文献，以便感兴趣的读者可以对这些方法和观点追根求源。很少有人会从头到尾读这本书，但我们希望对于分子克隆感兴趣的人员将会从这些书页中找到许多有助于他们思考和有助于他们手头工作的内容。

内容概要

本书在第三版中，作者对图书内容进行了完全的升级，修订了实验的每条方案，增加了大量新的材料，拓宽了它涉及的领域，内容丰富而详细。使其具有用于学习遗传学、分子细胞生物学、发育生物学、微生物学、神经科学和免疫学等学科的重要指导和参考价值。 本书可供生物学、医药卫生，以及农、林、牧等方面有关的科研、教学与技术人员参考。

书籍目录

中译本序译者的话   第三版前言 上册   第1章 质粒及其在分子克隆中的应用   第2章 λ噬菌体及其载体   第3章 M13噬菌体载体   第4章 高容量载体的应用   第5章 DNA凝胶电泳和脉冲场琼脂糖凝胶电泳   第6章 真核基因组DNA的制备和分析   第7章 真核细胞mRNA的提取、纯化和分析   第8章 聚合酶链式反应体外扩增DNA   第9章 放射性标记DNA探针与RNA探针的制备   第10章 合成寡核苷酸探针   第11章 cDNA文库制备及其基因鉴定 下册   第12章 DNA测序   第13章 诱变   第14章 表达文库的筛选   第15章 在大肠杆菌中表达克隆化基因   第16章 哺乳动物培养细胞中导入克隆化基因   第17章 哺乳动物培养细胞的基因表达分析   第18章 蛋白质相互作用研究技术附录 　附录1 分子克隆中使用的缓冲液和试剂的配制 　附录2 培养基 　附录3 载体和细菌菌株 　附录4 分子克隆所用的酶 　附录5 酶的抑制物 　附录6 核酸 　附录7 密码子和氨基酸 　附录8 分子克隆中的常用技术 　附录9 检测系统 　附录10 DNA阵列技术 　附录11 生物信息学 　附录12 告诫 　附录13 供应商 　附录14 商标 索引 编辑致谢

章节摘录

　　传统的高拷贝数质粒载体携带有各种colEl复制子；相反地，低拷贝数的质粒载体带有如R1之类的复制子，因而只能在非常严谨的条件下维持质粒I）NA的合成。　　第一代的低拷贝载体，按今天的标准而言可算是相当巨大而粗糙，它们曾被用来解决特定的外源基因和DNA序列克隆到质粒中后出现的毒性问题。编码膜蛋白和DNA结合蛋白的许多基因属于此类，某些启动子和调节序列也是如此（参见Fill et a1。1979；HIansen and vorl Meyenberg 1979；Little 1979；Murray and Kelley 1979；Beck andBremer 1980；Claverie。Martin et a1。1989）。有时这些I）NA序列和基因产物对宿主菌的毒性太大，以至于用高拷贝数的载体分离转化的菌株简直是不可能的。即使获得了转化子，它们的生长速率通常极低，克隆化的外源I）NA序列也不稳定。为解决这类问题，已经建立了多用途的低拷贝数载体，它们不仅带有受到严格调控的原核启动子，仅维持低水平本底表达（如pET系列载体），而且携有防止外源DNA序列从上游质粒启动子过多转录的原核转录终止子。现在这些低拷贝数的载体被添上了多克隆位点、单链噬菌体的复制起点、T3和T7的启动子和其他有用的调节子。现有的多数低拷贝数载体也携带par基因座，它在细胞分裂过程中促进质粒分子在子细胞中的精确分配。　　……

编辑推荐

　　《分子克隆实验指南（上下）（第3版）》可供生物学、医药卫生，以及农、林、牧等方面有关的科研、教学与技术人员参考。

用户评论 (总计107条)

•   分子生物学专业教师、研究生的经典参考书，实验必备工具书。
•   分子克隆实验指南用书质量好，值得买 值得读
•   分子生物学的圣经，工具书，内容全面，实用
•   这书很详细 老早就想买一本 之前借的学校图书馆 在分子克隆方面可以说是相当于汉语新华字典 质量也很好 绝对正版 做分子不可缺少的工具书
•   分子生物学实验的宝典
•   购买此书的都知道——分子生物学实验的金标准，而且价格相当的厚道。
•   此书是分子生物学实验用书的经典，，值得拥有。
•   分子生物学实验的红宝书，一定要买，不错，顶
•   很喜欢，是分子生物学方面必备的书。当当发货很快的
•   分子生物学实验室必备。很赞
•   经典著作，分子克隆工作者必备，非常不错，建议购买!
•   还没来得及看，因为很多做分子生物学的都把它当做指导书，只要是正版的肯定没问题。
•   很经典的书，分子生物学的宝典
•   是做分子克隆不可或缺的一套好书
•   分子克隆的经典好书，很好很好
•   书是正版，质量好。好书了，分子克隆讲的很全面细致
•   不愧为分子实验中的圣经。
•   被誉为分子实验室的“圣经”，果然名不虚传，很厚，相当于工具书了，很好。
•   是因为要接触分子生物实验，在丁香园上，网友推荐才买来一看，因为手头相关的书籍不是很多。现在虽然换做临床实验，但有本生物分子实验书籍，有疑问的时候可以随时翻阅一下还是很不错的。但很多在书上还是不能找到答案，就需要上网查了。这本书是比较偏基础，纯属个人意见。
•   经典书，分子生物实验必看！
•   不愧是生物学中的圣经\(^o^)/~
•   非常经典的分子生物基本书，特别是附录齐全，内容明确清楚。分子生物实验室必备书籍。
•   速度快，两天就到了，书本质量好，跟在图书馆借的第三版第一次印刷本比较了下，除了书本的封面有点改变以外，内容是一致的。对第一次在当当网上所购图书本人非常满意～！
•   这本书真的很好，100多块钱感觉超值！而且相比我买的下面那本分子生物学，不管是价格质量包装都好狠多
•   工作需要，买了一套做工具书。内容丰富充实，实用性强。非常具有参考价值！
•   很好的工具书，在实验过程中需要参考
•   以前看第一版感觉就很好，买第三版希望对工作有所帮助
•   以前我们有第二版，书已经翻烂了。决定买第三版，书的质量还不错
•   很好很实用的实验指南！
•   内容详细，翻译得当，是实验用书的好指导
•   书的内容很多，很喜欢！希望能在实验方面有所指导和帮助！！！！！！！！！！！！！！！
•   不错的实验圣经
•   这本书是做基础必备的实验之王。
•   做实验必备。经典书籍。
•   质量很好，实验必备用书，不愧是经典！
•   实验必备用书啊，冷泉港实验室就是牛逼。
•   冷泉港实验室的经典之作
  详细的实验流程
  独一无二的经典
•   这是套经典著作，做生命科学研究的应该人手一本。
•   没办法，要做实验，要查溶液配比，少它不行啊。
•   对于实验入门者，实用，但是有些说得和自己实验室情况结合不是很紧咯
•   这是实验金标准
•   书是老公挑着买的。对于做实验很有帮助。推荐给大家。
•   很权威实用全面的实验指导书
•   为实验室买的。属于比较实用的书。很多技术还是具有指导意义的。
•   我从当当网购物已有多次了，主要是图书，感觉它的图书比较全，价格较低，送货基本在2天，书籍是正版的，服务很令人满意！
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•   书还可以，内容不错，但是到底是一册124元还是上下册共124元，我只收到上册，很奇怪！
•   书的质量还不错，内容很详细。
•   书本内容丰富，服务质量较好
•   是正版，比书店便宜。工具书。
•   换新的封皮了，挺清爽的，内容不多说的，实用第一。
•   帮朋友买的，内容很新，印刷质量也不错！
•   图书质量很好，很值得推荐的一本书。
•   内容很多，要在实践中检验
•   我是看了电影之后有兴趣看看这本书的，书中的人物形象比电影里更丰满，如果在西安生活过，就会更有感触
•   只发了一册，我给退了，书是好书
•   确实很实用指导我前进
•   封面有点脏，不过内容好就行了，还是很不错的参考书
•   内容很细，讲的很清楚，相当不错
•   内容就不说了 学这专业的都知道 价钱比书店的便宜 不错
•   整体感觉很不错，内容全面实用。送货速度挺快，2天内就到了。
•   对我们的工作有非常重要的作用
•   本实验室有一套，这一套是给新开的实验室买的
•   书质量很好，而且还是新的封面，看起来、摸起来都舒服，嘿嘿。
•   当当网的客服还是不错的，送过来时还用一个纸箱包着，书很新很完整，就是送货时间太长了，等了一星期
•   还没有看，希望有大用，好好学习
•   学习用的，好好学习，天天向上
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•   这本书就不用多说了，正版质量很好
•   买的送给朋友的，她在香港，点名要这本书
•   对于学医的来说，这本书非常好。
•   本书货真价实，对我们工作有很大帮助。
•   这本书挺好的，质量也不错。值得购买。
•   不错，就是太厚了，只适合在家里看，不适合拿到其它地方去，因为实在大重了，快递都不乐意给我送上楼。
•   为客户买的，快递非常给力。上午订的，下午就送到了。
•   送货速度较快，书籍质量不错
•   北京买不了，只好寄到朋友那里，真够费劲的，希望以后区域购买的能够提示哪里可以购买
•   好好好好好~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~`
•   物美价廉，很实用。还是当当网买书好。
•   这本书对自己的工作帮助很大
•   一直想买！终于盼到降价了！我从网上看到第四版的英文版已经出版了，如果不急着用的话可以等，估计中文版一年后就会出版。
•   慢慢看，有需要用的知识就查一下
•   很实用，是宝典
•   书很经典，而且质量很好，价格又实惠
•   书质量不错 学生们很喜欢
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•   书不错，但是我要的发票未一起快递。
•   很经典，就是好厚！
•   给实验室的 反馈很好
•   经典俩字足以概括
•   好是好。有些难，呵呵，看不太懂。和想的不太一样。不通俗
•   对于研究生来说很实用
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•   期待很久了，绝对的经典啊
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•   印刷不错，价钱比书店可便宜不少
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