核酸探针与原位杂交技术

出版时间：2001-12  出版社：上海第二军医大学出版社  作者：向正华 刘厚奇  页数：192  字数：162000  

内容概要

目前许多学科均采用核酸探针与原位杂交技术，使其研究跨上一个新台阶达到了分子水平。本书共分九章。内容包括：相关的基础知识；核酸杂交技术的发展和应用范围；各种核酸探针的制备过程；原位杂交技术条件选择、标本制备和不同实验操作方法及其注意事项；计算机处理杂交信号的基本原理及操作时的注意事项；附录中介绍了相关试剂的配制。本书短小精悍，注重实际操作，可供广大从事生物医学研究工作者使用。

书籍目录

第一章  核酸探针与原位杂交技术的基础知识  第一节  核酸的分子结构  第二节  核酸的变性与复性  第三节  工具酶  第四节  载体  第五节  DNA重组技术第二章  核酸分子杂交技术的建立与进展  第一节  核酸分子杂交技术建立与发展  第二节  原位杂交技术建立与发展  第三节  原位杂交组织化学技术的应用第三章  核酸探针模板的制备  第一节  感受态细菌的制备和质粒的转化  第二节  重组质粒的大量扩增  第三节  重组质粒的小量扩增、抽提和纯化  第四节  通过核酸限制性内切酶制备目的cDNA片段  第五节  转录cDNA用的线性DNA模板的制备  第六节  寡聚核苷酸的制备  第七节  用RT-PCR方法制备核酸探针模板  第八节  应用PCR方法制备核酸探针模板第四章  核酸探针的放射性标记和纯化方法  第一节  放射性物质一般特性  第二节  通过酶学修饰标记DNA第五章  核酸探针的非放射性标记方法  第一节  通过缺口平移法用修饰的苷酸标记DNA的方法  第二节  能地随机引物法用修饰苷酸标记的DNA  第三节  接尾法标记DNA片段  第四节  生物素化的RNA探针的制备  第五节  地高辛反义cRNA探针的制备  第六节  寡核苷酸的标记  第七节  核苷酸的原位标记法第六章  原位核酸分子杂交实验条件的选择  第一节  探针选择和特异性  第二节  核酸分子杂交的速率  第三节  核酸探针浓度  第四节  杂交及洗涤条件的严格性  第五节  杂交反应的促进剂  第六节  探针长度 ……第七章  原位杂交组织化学所用组织细胞标本的制备第八章  原位杂交组织化学实验步骤第九章  应用计算机图像分析系统对原位杂交信号的定量分析附录：核酸探针与原位杂交技术所需仪器与试剂