现代基因操作技术

出版时间：2000-10  出版社：人民军医出版社  作者：万泽生等编  页数：371  字数：544000  

内容概要

本书针对国内医学分子生物学实验研究的实际需要，详细介绍了基因操作技术，包括基因分离与基因作图PCR条件最佳化及特殊PCR、PCR产物的克隆、突变与重组技术、对已知序列两旁未知序列的克隆方法、cDNA文库的构建与筛选、用差示法和扣除法做cDNA分析与克隆、寡核苷酸启动的原位DNA合成技术、原位多聚酶链反应技术等。内容先进，实用性强，可供临床和基础医学各专业从事分子生物学实验研究的工作人员参考学习。

书籍目录

第一篇　基因分离与基因作图  第1章　基因定位：从FISH到序列数据库  第2章　遗传性状的连锁分析  第3章　用体细胞杂交进行基因作图  第4章　用FISH技术进行基因作图  第5章　用FISH进行DNA位点排序与测距  第6章　基因物理作图——脉冲场凝胶电泳法  第7章　疾病基因间区YAC重叠群的构建和应用  第8章　粘粒重叠文库的构建与应用  第9章　用二核苷酸多态性分析作物理图  第10章　用多重PCR作表达序列标签图谱  第11章　用外显子捕获法分离基因  第12章　用直接选择法从基因组分离编码序列  第13章　用YAC杂交筛查法分离cDNAs  第14章　差异表达基因的检测与分离  第15章　化学交联扣除法  第16章　基因制图、基因分离与数据库访问第二篇　PCR条件最佳化及特殊PCR  第17章　PCR基本原理及关键问题  第18章　Touchdown PCR及Stepdown PCR——一步法达到条件最佳化的    PCR技术  第19章　长靶序列的XL PCR扩增  第20章　用Tub DNA聚合酶作长序列PCR扩增  第21章　高GC含量模板的扩增——PCR反应中的溶剂效应  第22章　RT—PCR克隆cDNA大片段第三篇　PCR产物的克隆  第23章　用T4 DNA聚合酶生成可克隆PCR产物  第24章　PCR产物的非酶连接法快速克隆  第25章　PCR产物的T/A克隆法  第26章　T-载体的构建  第27章　用AT-接头做PCR产物的修饰和定向克隆第四篇　突变与重组技术  第28章　用重组PCR做重组和定点突变  第29章　DNA的体外重组与突变  第30章　用PCR法做插入、删除和嵌合连接  第31章　用Megaprimer PCR进行基因突变和基因融合  第32章　快速高效的突变方法——PCR-管法  第33章　用耐热连接酶及PCR生成突变分子  第34章　用PCR突变接头探查基因转录调控原件  第35章　用翻转PCR进行序列倒转  第36章　用GB—D聚合酶及平板快速筛选法做定点突变  第37章　用SELEX组合化学法分离高亲和性的核酸配体第五篇　对已知序列两旁未知序列的克隆方法  第38章　cDNA末端的快速扩增  第39章　用单侧特异性引物扩增基因的调控区序列  第40章　末端修饰PCR扩增相邻未知DNA序列  第41章　用mRNA 5端加上一段确定序列用于克隆全长mRNA  第42章　用Step—Out PCR在DNA克隆中做快速定向步移  第43章　反向PCR快速扩增cDNA末端  第44章　用锚定PCR方法从基因文库中快速扩增基因末端  第45章　用外显子扩增法从酵母人工染色体中分离基因编码序列第六篇　cDNA文库的构建与筛选  第46章　从少量细胞制备cDNA文库  第47章　重组DNA文库的非放射性PCR快速筛选法  第48章　用PCR筛选cDNA文库  第49章　噬菌体DNA亚库的构建及PCR筛选  第50章　用简并引物PCR克隆基因家族中的成员基因  第51章　用含肌苷的简并引物扩增分离低相似性基因第七篇　用差示法和扣除法做cDNA分析与克隆  第52章　用分子选择法对cDNA序列表现度作归化处理  第53章　用磁珠技术和PCR做扣除cDNA克隆  第54章　扣除cDNA的PCR再生  第55章　用PCR对cDNA库进行差示筛选  第56章　用DDRT—PCR鉴定和克隆差异表达的基因第八篇　寡核苷酸启动的原位DNA合成技术  第57章　寡核苷酸启动的原位DNA合成　……第九篇　原位多聚酶链反应技术