细胞生物学实验技术

出版时间：2011-8  出版社：化学工业  作者：章静波//黄东阳//方瑾  页数：243  
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内容概要

　　为了跟上学科的发展，适应发展的需要，作者对《细胞生物学实验技术》进行修订更新，推出第二版，新版适合大多数院校(普通高等学校及医药院校)研究生与本科生学习细胞生物学技术的需要。特点在于：
　　基础训练为主，同时增加最新而又不难掌握与了解的技术。本版中除了保留原有大部分内容之外，根据反馈意见增加了作为生物学与医学研究最基本手段的组织学切片技术，也不失时宜地补充了多种干细胞培养的培养方法、鉴定及运用，其中包括诱导多潜能干细胞(iPScells)和肿瘤干细胞培养、细胞自噬、端粒与端粒酶显示技术、酵母双杂交技术、昆虫杆状病毒表达系统等。
　　本版也尝试采用如同《精编细胞生物学实验指南》(ShodProtocols in CellBiology，edJS
Bonifacino，et
al，byJohnWiley&Sonslnc．)那样将所介绍的方法分为基本方案、备择方案和支持方案3类。基本方案是指总体推荐或是最普遍应用的方法，也是使用者应力求掌握的方法。备择方案乃针对采用不同设备和试剂而达到相同结果时可选用者，或许可以认为它是基本方案的一种补充与佐证。支持方案所描述的是进行基本方案或备择方案所需要的那些附加步骤，这些步骤独立于核心方案，它们或许也可以在其他实验中用到。
　　本书可以作为相关高等院校的本科教材，也可供从事细胞生物学研究工作的人员阅读参考。
　　读者对象:本书可以作为相关高等院校的本科教材，也可供从事细胞生物学研究工作的人员阅读参考。

作者简介

章静波，中国协和医科大学教授、博士生导师，兼任中华医学会细胞生物学会副主任委员，《解剖学报》主编，《基础医学与临床》总编，长期从事细胞生物学研究。曾任第四届中国科普作家协会医药委员会副主任委员。

书籍目录

第一章　显微镜技术
　基本方案1　普通显微镜的构造及使用方法
　基本方案2　相差显微镜的构造及使用方法
　基本方案3　荧光显微镜的构造及使用方法
　基本方案4　透射电子显微镜与超薄切片技术
　基本方案5　扫描电子显微镜与样品制备
　备择方案1　激光扫描共聚焦显微镜的构造及使用方法
　备择方案2　激光捕获显微切割技术
　支持方案显微摄影技术
第二章　组织学基本技术
　基本方案1　石蜡切片技术
　基本方案2　冰冻切片技术
　基本方案3　苏木素?伊红（hematoxylin?eosinstain,HE）染色技术
　备择方案1　吉姆萨（Giemsa）染色技术
　备择方案2　组织学切片的Feulgen染色技术
　备择方案3　中性脂肪油红O显示（Oil red O stain）技术
　备择方案4　组织切片的碱性磷酸酶染色技术（ALP钙?钴法）
　备择方案5　组织切片的琥珀酸脱氢酶染色（SDH stain）技术
　备择方案6　组织切片的核酸甲苯胺蓝显示技术
第三章　细胞结构与成分的显示技术
　基本方案1　细胞中DNA和RNA的显示
　基本方案2　细胞中过氧化物酶的显示
　基本方案3　细胞中碱性蛋白的显示
　基本方案4　一氧化氮合酶的显示
　基本方案5　细胞中线粒体的活体染色
　基本方案6　细胞中糖类和脂类的显示
　基本方案7　酸性磷酸酶的显示
　备择方案1　细胞中液泡系的活体染色
　备择方案2　培养细胞完整生物膜系统的观察
　备择方案3　微丝的染色及形态观察 支持方案间接免疫荧光技术显示胞质微管
第四章　细胞生理实验
　基本方案1　细胞的运动
　基本方案2　细胞的吞噬活动
　基本方案3　细胞自噬检测方法
　备择方案细胞膜通透性的测定
第五章　细胞培养和分析
　基本方案1　细胞的原代培养
　基本方案2　培养细胞的形态观察和计数
　基本方案3　培养细胞生长曲线的绘制和分裂指数的测定
　基本方案4　细胞集落形成实验
　基本方案5　器官培养方法
　基本方案6　鸡胚尿囊培养法
　备择方案1　细胞的传代培养
　备择方案2　MTT对细胞生长状况的检测
　备择方案3　表皮细胞的培养
　备择方案4　骨骼肌细胞的培养
　备择方案5　内皮细胞的培养
　备择方案6　神经胶质细胞的培养
　备择方案7　骨髓间充质干细胞的培养及其体外诱导分化
　支持方案1　细胞的冻存与复苏
　支持方案2　细胞显微测量技术
　支持方案3　细胞培养中支原体污染的检测
　支持方案4　放射自显影术及同位素液闪测定
第六章　干细胞培养及诱导分化
　基本方案1　人胚胎干细胞传代培养
　基本方案2　人胚胎干细胞的诱导分化
　基本方案3　肿瘤干细胞的分离纯化
　备择方案诱导多潜能干细胞
　支持方案小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）
　的分离及饲养层的制备
第七章　细胞周期分析
　基本方案流式细胞仪检测细胞周期
　备择方案1　细胞同步化实验
　备择方案2　通过分析CDK的活性检测细胞周期
第八章　细胞成分的分离与分析
　基本方案1　差速离心法分离细胞和细胞器
　基本方案2　密度梯度离心法分离细胞组分
　基本方案3　SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质
　基本方案4　Western印迹技术
　备择方案免疫沉淀法
　支持方案蛋白质的双向聚丙烯酰胺凝胶电泳
第九章　细胞工程基础技术
　基本方案1　细胞融合实验
　基本方案2　单克隆抗体的制备
　备择方案1　染色体提前凝集标本的制备
　备择方案2　显微注射技术（核移植）
　备择方案3　DNA转染实验（绿色荧光蛋白）
　支持方案体外受精技术
第十章　细胞凋亡的测定
　基本方案1　凋亡细胞的普通光镜观察
　基本方案2　凋亡细胞的荧光显微镜观察
　基本方案3　凋亡细胞的琼脂糖凝胶电泳检测——DNA梯状条带（DNA ladder）
　备择方案1　凋亡细胞的电镜观察
　备择方案2　凋亡细胞的原位末端标记法检测
　备择方案3　凋亡细胞的单细胞电泳检测
　备择方案4　凋亡细胞的流式细胞法检测
　支持方案磷酸酰丝氨酸外化的流式细胞术分析
第十一章　染色体技术
　基本方案1　染色体标本制备
　基本方案2　端粒及端粒酶显示技术
　备择方案1　染色体显带技术
　备择方案2　性染色质的制备
　备择方案3　姐妹染色单体交换实验
　备择方案4　染色体原位杂交技术
　支持方案染色体实验试剂配制
第十二章　分子细胞生物学技术
　基本方案1　DNA提取及检测
　基本方案2　RNA提取及检测
　基本方案3　Southern印迹技术
　基本方案4　Northern印迹技术
　基本方案5　RNA干扰技术
　基本方案6　酵母双杂交技术
　备择方案1　RT?PCR
　备择方案2　原位PCR技术
　备择方案3　荧光定量PCR技术
　备择方案4　基因芯片技术
　备择方案5　原位缺口平移技术
　备择方案6　染色质免疫沉淀法
　备择方案7　昆虫杆状病毒表达系统
　备择方案8　GST pull?down分析
参考文献
　　

章节摘录

版权页：插图：人们开始研究活细胞内细胞质的流动、变性运动、纤毛与鞭毛的运动以及肌肉收缩等细胞生理学问题是在19世纪末。此后随着技术的发展，人们又开始研究细胞膜及其通透性、细胞的应激性与神经传导等，并取得诸多方面的进展。细胞生理学主要研究细胞对其周围环境的反应，细胞生长与繁殖的机制，细胞从环境中摄取营养的能力，机体的代谢功能、细胞的兴奋性、吸收与分泌及细胞活动等所表现出的其他机制，生物膜的主动运输和能量转换与生物电等种种现象。在细胞生物学，尤其分子细胞学快速发展的今天，作为其一个分支的细胞生理学似乎在逐渐淡化，然而细胞生理学仍不失其重要性，而且其研究内容也在不断延伸，并与其他分支学科交融发展，更显其活力。本章通过分离特定的动物细胞，并经过处理后在显微镜下观察巨噬细胞和白细胞的吞噬作用、细胞自噬、纤毛和鞭毛的运动以及细胞膜通透性的测定。本章对于从事免疫学、药理学及生殖生物学等学科的研究者尤为重要与实用。基本方案1细胞的运动【原理与应用】纤毛与鞭毛是单细胞或多细胞生物细胞表面伸出的特化结构，其内部是由微管组成的轴（轴中央由2条微管组成，外围由9组二联微管环绕），轴的基部与基体相连，周围被细胞膜所包绕。直径为0.15～0.3μm，属于细胞的运动器官。其运动一般认为是由二联微管间的滑动所引起，鞭毛运动方式为波浪式、纤毛运动为波动式。暗视野照明法是一种使照射被检物体的光线不直接进入物镜的照明方法。常用它观察未染色的活体细胞或胶体粒子。利用此法，在显微镜下观察时直接看不到通过标本的照明光线，而是被检物反射或衍射的光线进入物镜，可提高分辨率，在暗视野中可以看到明亮的被检物体的存在和运动，但它们的内部结构却看不清楚。

编辑推荐

《细胞生物学实验技术(第2版)》为生物实验室系列之一。

用户评论 (总计11条)

•   细胞实验的必备用书 本科没做过 研究生就靠它了
•   方法很详细，适合实验参考
•   山东大学细胞考研必备~是正版，还不错~
•   非常实用，买来给实验室的学生作为实验手册阅读，很有帮助，
•   又是一本技术参考书~
•   这本书8错8错
•   先买的分子克隆实验指南精编版，挺好的，就又买了细胞的这个，也不错
•   这本书内容全面，挺好的！
•   很喜欢 是想要的那本 质量很好
•   这是山东大学生物系考研参考书，自2012年起山东大学生物系考研不再指定参考书目，这是为数不多的一本。
•   相对来说，章静波的书还值得信任，排版不错，内容较新但不能说全，还是有几样我比较关心的技术没有涉及或太简略